CRISPR-Cas9基因编辑:基因编辑是指通过改变生物体基因组中的DNA序列,来修改和调控特定基因的表达或功能。CRISPR-Cas9基因编辑技术是一种广泛应用的基因编辑方法,它利用CRISPR(簇间重复短回文序列)和Cas9(CRISPR相关的蛋白质9)酶的系统来实现精确的基因组编辑。
CRISPR-Cas9基因编辑主要包含:基因功能研究、群体编辑、基因启动子调控、基因组大规模筛选、CRISPR基因驱动系统、遗传性疾病治疗、农业育种、传染病控制、基因治疗等
基因功能研究、:CRISPR-Cas9技术可以用来研究基因的功能和调控机制。通过编辑特定的基因或调节其表达水平,可以揭示基因对生物学过程和疾病发生发展的作用,帮助我们更好地理解基因与表型之间的关系。
基因组大规模筛选:CRISPR-Cas9技术的高效性和准确性使其成为基因组规模筛选的强大工具,建立基因敲定或过表达的文库,并应用于发现与特定生物过程或疾病相关的基因。
CRISPR基因驱动系统:CRISPR基因编辑技术不仅可以用于基因突变的修复和替换,还可以用于驱动特定基因在物种中的传递。利用CRISPR-Cas9技术,可以构建基因驱动系统,将目标基因的突变传递给物种的后代,以实现一些生物控制和环境管理的目的,例如控制害虫数量、阻断传染病传播等。
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一. 基因编辑工具介绍
1. 基因编辑和转基因是一样的吗?
2. 生活中的基因编辑与转基因产品
3. 基因编辑工具先驱-ZFNs和TALENs
4. 没落的ZFNs和TALENs
5. TALENs,旧工具新用,细胞器编辑利器!
6. 强势崛起的CRISPR系统
7. CRISPR系统家族介绍
8. CRISPR-Cas9的工作原理
9. CRISPR-Cas12的工作原理
10. CRISPR系统的致命缺点
11. 如何选择合适的CRISPR系统?
第二至三天
二. CRISPR系统可以做什么?
1. 基因敲除/基因敲入
i. 基因修复途径介绍(NHEJ和HDR)
ii. Knock-in和Knock-out的简介
iii. Knock-in策略简介(HDR/Retron/双pegRNA策略/GRAND/TJ-PE)
2. 多敲系统简介
3. CRISPRa/CRISPRi(基因激活与基因抑制)
i. dCas9-PVPR系统介绍
ii. dCas9-VP64/GI/SAM基因激活系统介绍
iii. 基因编辑招募系统介绍(Suntag/Moontag)
4. CRISPR系统的‘另类’应用(循环打靶)
5. CBE系统的原理及其应用
i. CBE系统进化过程总结(CBEmax/每代优化的元件及策略汇总)
ii. 基因组CBE编辑(植物育种/基因功能研究/临床治疗)
iii. 细胞器CBE编辑工具介绍(Ddda脱氨酶/MutH切口酶)
iv. CBE系统的脱靶效应
6. ABE系统的原理及其应用
i. PACE和PANCE人工定向蛋白进化系统介绍及其他常规的蛋白进化技术
ii. ABE系统的进化过程总结(ABEmax/ABE8e每代优化的元件及策略汇总)
iii. ABE系统的‘另类’应用(基因失活/跳剪/介导C编辑)
iv. 双碱基编辑系统(SWISS/STEME/A&C-BEmax/SPACE/ACBE)
7. PE系统的原理及其应用
i. PE介导精准编辑
ii. 编辑效率的影响因素(骨架二级结构/PBS长度/RTT模板)
iii. 双pegRNA的原理及其应用(基因组大片段插入)
iv. 基因组大片段删除
v. 用于AAV递送的PE系统
8. gGBE的原理及其应用
i. 糖基化酶介绍(为什么可以介导碱基编辑?)
ii. gGBE的开发与应用
iii. gGBE的后续发展预测
9. CRISPR-Case12的病毒检测应用
i. 原理介绍
ii. 应用案例介绍
2. 生活中的基因编辑与转基因产品
3. 基因编辑工具先驱-ZFNs和TALENs
4. 没落的ZFNs和TALENs
5. TALENs,旧工具新用,细胞器编辑利器!
6. 强势崛起的CRISPR系统
7. CRISPR系统家族介绍
8. CRISPR-Cas9的工作原理
9. CRISPR-Cas12的工作原理
10. CRISPR系统的致命缺点
11. 如何选择合适的CRISPR系统?
第四天
三. CRISPR载体构建(实操)
1. 敲除/碱基编辑载体构建
i. 工具介绍
ii. 如何查看质粒图谱
iii. 基因靶点的选择(CRISPR-GE等线上工具展示)
iv. sgRNA的引物设计
v. 模拟构建(酶切载体/构建体系讲解)
vi. 菌落PCR
vii. 测序鉴定结果分析
2. PE系统的载体构建
i. 引物设计工具的应用
ii. 载体构建演示
iii. 测序结果分析
3. 转染阳性检测
4. 测序原理及结果查看
i. 一代测序原理
ii. Hi-TOM高通量测序
第五天
四. 基因编辑在植物种的应用
1. 基因功能研究
2. 创制新品种
五. 基因编辑在临床上的应用
1. 碱基编辑的临床应用
2. PE系统的临床应用
3. 递送系统的介绍
六. 基因编辑在微生物中的应用
1. 微生物遗传学研究
2. 生物技术(可产生生物燃料/生物塑料/药物等有用的化合物)
七. 机器学习在基因编辑领域的应用
1. 基因编辑结果的预测
2. 编辑效率影响因素的探索
3.基因编辑辅助工具的开发
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标签:系统,基因,ii,编辑,CRISPR,Cas9 From: https://blog.csdn.net/2402_89313370/article/details/144233048