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CRISPR-Cas9基因编辑

时间:2024-12-04 10:59:15浏览次数:7  
标签:系统 基因 ii 编辑 CRISPR Cas9

CRISPR-Cas9基因编辑:基因编辑是指通过改变生物体基因组中的DNA序列,来修改和调控特定基因的表达或功能。CRISPR-Cas9基因编辑技术是一种广泛应用的基因编辑方法,它利用CRISPR(簇间重复短回文序列)和Cas9(CRISPR相关的蛋白质9)酶的系统来实现精确的基因组编辑。

     CRISPR-Cas9基因编辑主要包含:基因功能研究、群体编辑、基因启动子调控、基因组大规模筛选、CRISPR基因驱动系统、遗传性疾病治疗、农业育种、传染病控制、基因治疗等

     基因功能研究、:CRISPR-Cas9技术可以用来研究基因的功能和调控机制。通过编辑特定的基因或调节其表达水平,可以揭示基因对生物学过程和疾病发生发展的作用,帮助我们更好地理解基因与表型之间的关系。

     基因组大规模筛选:CRISPR-Cas9技术的高效性和准确性使其成为基因组规模筛选的强大工具,建立基因敲定或过表达的文库,并应用于发现与特定生物过程或疾病相关的基因。

       CRISPR基因驱动系统:CRISPR基因编辑技术不仅可以用于基因突变的修复和替换,还可以用于驱动特定基因在物种中的传递。利用CRISPR-Cas9技术,可以构建基因驱动系统,将目标基因的突变传递给物种的后代,以实现一些生物控制和环境管理的目的,例如控制害虫数量、阻断传染病传播等。

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一. 基因编辑工具介绍

1. 基因编辑和转基因是一样的吗?

2. 生活中的基因编辑与转基因产品

3. 基因编辑工具先驱-ZFNs和TALENs

4. 没落的ZFNs和TALENs

5. TALENs,旧工具新用,细胞器编辑利器!

6. 强势崛起的CRISPR系统

7. CRISPR系统家族介绍

8. CRISPR-Cas9的工作原理

9. CRISPR-Cas12的工作原理

10. CRISPR系统的致命缺点

11. 如何选择合适的CRISPR系统?

第二至三天

二. CRISPR系统可以做什么?

1. 基因敲除/基因敲入

i. 基因修复途径介绍(NHEJ和HDR)

ii. Knock-in和Knock-out的简介

iii. Knock-in策略简介(HDR/Retron/双pegRNA策略/GRAND/TJ-PE)                               

2. 多敲系统简介

3. CRISPRa/CRISPRi(基因激活与基因抑制)

i. dCas9-PVPR系统介绍

ii. dCas9-VP64/GI/SAM基因激活系统介绍

iii. 基因编辑招募系统介绍(Suntag/Moontag)

4. CRISPR系统的‘另类’应用(循环打靶)

5. CBE系统的原理及其应用

i. CBE系统进化过程总结(CBEmax/每代优化的元件及策略汇总)

ii. 基因组CBE编辑(植物育种/基因功能研究/临床治疗)

iii. 细胞器CBE编辑工具介绍(Ddda脱氨酶/MutH切口酶)

iv. CBE系统的脱靶效应

6. ABE系统的原理及其应用

i. PACE和PANCE人工定向蛋白进化系统介绍及其他常规的蛋白进化技术

ii. ABE系统的进化过程总结(ABEmax/ABE8e每代优化的元件及策略汇总)

iii. ABE系统的‘另类’应用(基因失活/跳剪/介导C编辑)

iv. 双碱基编辑系统(SWISS/STEME/A&C-BEmax/SPACE/ACBE)

7. PE系统的原理及其应用

i. PE介导精准编辑

ii. 编辑效率的影响因素(骨架二级结构/PBS长度/RTT模板)

iii. 双pegRNA的原理及其应用(基因组大片段插入)

iv. 基因组大片段删除

v. 用于AAV递送的PE系统

8. gGBE的原理及其应用

i. 糖基化酶介绍(为什么可以介导碱基编辑?)

ii. gGBE的开发与应用

iii. gGBE的后续发展预测

9. CRISPR-Case12的病毒检测应用

i. 原理介绍

ii. 应用案例介绍

2. 生活中的基因编辑与转基因产品

3. 基因编辑工具先驱-ZFNs和TALENs

4. 没落的ZFNs和TALENs

5. TALENs,旧工具新用,细胞器编辑利器!

6. 强势崛起的CRISPR系统

7. CRISPR系统家族介绍

8. CRISPR-Cas9的工作原理

9. CRISPR-Cas12的工作原理

10. CRISPR系统的致命缺点

11. 如何选择合适的CRISPR系统?

第四天

三. CRISPR载体构建(实操)

1. 敲除/碱基编辑载体构建

i. 工具介绍

ii. 如何查看质粒图谱

iii. 基因靶点的选择(CRISPR-GE等线上工具展示)

iv. sgRNA的引物设计

v. 模拟构建(酶切载体/构建体系讲解)

vi. 菌落PCR

vii. 测序鉴定结果分析

2. PE系统的载体构建

i. 引物设计工具的应用

ii. 载体构建演示

iii. 测序结果分析

3. 转染阳性检测

4. 测序原理及结果查看

i. 一代测序原理

ii. Hi-TOM高通量测序

第五天

四. 基因编辑在植物种的应用

1. 基因功能研究

2. 创制新品种

五. 基因编辑在临床上的应用

1. 碱基编辑的临床应用

2. PE系统的临床应用

3. 递送系统的介绍

六. 基因编辑在微生物中的应用

1. 微生物遗传学研究

2. 生物技术(可产生生物燃料/生物塑料/药物等有用的化合物)

七. 机器学习在基因编辑领域的应用

1. 基因编辑结果的预测

2. 编辑效率影响因素的探索

3.基因编辑辅助工具的开发

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标签:系统,基因,ii,编辑,CRISPR,Cas9
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