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Xenium In Situ数据的质量评估及优化方案(试用版)

时间:2024-06-06 13:59:48浏览次数:30  
标签:分割 based Baysor 结构域 Xenium 细胞 试用版 Situ

作者,Evil Genius
作为公司的分析人员,多方法比较和优化也是必修课。
今天我们来看看Xenium的一些分析点及可能得优化方案
Xenium本身的细胞分割更加适合于规整的、圆形或者其他形状不太奇怪的细胞,这一点得到了上海10X技术支持的确认,不过对于大多数样本,这个方法就够用了。
这一篇我们来看看对Xenium测试的基准测试,包括细胞分割、 segmentation-free analysis、空间可变基因选择和结构域识别等任务。
大家可以看一下昨天的文章ISS空间转录组的细胞分割算法汇总(stardist、cellpose、QuPath、SCS)
Xenium In Situ平台是一种新的空间转录组学产品,由10X Genomics商业化,能够在亚细胞分辨率下原位绘制数百个转录本(目前已经提升到了5000+的水平)。

细胞分割技术比较
方法比较:watershed, Cellpose,Baysor,Clustermap
测试结果,Baysor-based 的策略,特别是bayor结合Cellpose-based的分割是最佳分割策略

标准工作流的比较

Xenium的信号密度能够原位识别亚细胞结构

在Xenium数据集上对基因插入工具的性能进行基准测试

靶向SRT方法通常受到同时测量的基因数量的限制。代入方法通过从参考scrna序列到细胞分辨率SRT数据预测基因表达来克服这个问题

  • 软件测试:gimVI、SpaGE、Tangram、SpaOTsc和NovoSpaRc。
    通过Pearson相关系数(PCC)、结构相似指数(SSIM)、均方根误差(RMSE)和Jensen-Shannon散度(JS)对预测效果进行评价,其中PCC/SSIM值越高,RMSE/JS值越低表明预测精度越高。使用这些指标,SpaGE确定为性能最好的方法。此外,Tangram和SpaOTsc实现了整体高性能。

     

评估计算工具以探索组织结构

基于成像的SRT具有恢复单个细胞空间位置的能力,可用于破译组织内在结构的组织。

  • 分析软件:Squidpy和Giotto
    确定组织结构有助于理解其功能。确定最可靠的工具来定义这些领域具有普遍的意义,尽管目前还没有独立的比较。
  • neighborhood-based, Banksy,DeepST, SpaGCN
发现Banksy预测的结构域与手工标注的结构域最相似。

处理和分析Xenium数据集的最佳实践
将Xenium获得的数据作为输入,优化数据处理的第一个关键步骤是细胞分割。最优算法包括两个步骤:(1)使用Cellpose识别细胞核;(2)使用Baysor将reads分配给单个细胞。不需要细胞扩增,因为核外读取是使用Baysor分配的。如果细胞分割导致性能不佳,可以使

标签:分割,based,Baysor,结构域,Xenium,细胞,试用版,Situ
From: https://blog.csdn.net/weixin_53637133/article/details/139498609

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