作者,Evil Genius
作为公司的分析人员,多方法比较和优化也是必修课。
今天我们来看看Xenium的一些分析点及可能得优化方案
Xenium本身的细胞分割更加适合于规整的、圆形或者其他形状不太奇怪的细胞,这一点得到了上海10X技术支持的确认,不过对于大多数样本,这个方法就够用了。
这一篇我们来看看对Xenium测试的基准测试,包括细胞分割、 segmentation-free analysis、空间可变基因选择和结构域识别等任务。
大家可以看一下昨天的文章ISS空间转录组的细胞分割算法汇总(stardist、cellpose、QuPath、SCS)
Xenium In Situ平台是一种新的空间转录组学产品,由10X Genomics商业化,能够在亚细胞分辨率下原位绘制数百个转录本(目前已经提升到了5000+的水平)。
细胞分割技术比较
方法比较:watershed, Cellpose,Baysor,Clustermap
测试结果,Baysor-based 的策略,特别是bayor结合Cellpose-based的分割是最佳分割策略。
标准工作流的比较
Xenium的信号密度能够原位识别亚细胞结构
在Xenium数据集上对基因插入工具的性能进行基准测试
靶向SRT方法通常受到同时测量的基因数量的限制。代入方法通过从参考scrna序列到细胞分辨率SRT数据预测基因表达来克服这个问题
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软件测试:gimVI、SpaGE、Tangram、SpaOTsc和NovoSpaRc。
通过Pearson相关系数(PCC)、结构相似指数(SSIM)、均方根误差(RMSE)和Jensen-Shannon散度(JS)对预测效果进行评价,其中PCC/SSIM值越高,RMSE/JS值越低表明预测精度越高。使用这些指标,SpaGE确定为性能最好的方法。此外,Tangram和SpaOTsc实现了整体高性能。
评估计算工具以探索组织结构
基于成像的SRT具有恢复单个细胞空间位置的能力,可用于破译组织内在结构的组织。
- 分析软件:Squidpy和Giotto
确定组织结构有助于理解其功能。确定最可靠的工具来定义这些领域具有普遍的意义,尽管目前还没有独立的比较。 - neighborhood-based, Banksy,DeepST, SpaGCN