【HA标签 简介】
HA标签,全称为血凝素标签(Hemagglutinin Tag),是一种由9个氨基酸组成的多肽序列(YPYDVPDYA ),来源于人流感病毒HA分子的第98-106位残基。这个标签因其独特的物理化学性质和生物学功能,在现代分子生物学、细胞生物学以及生物化学研究中被广泛应用。
【中文名称】HA标签肽;血凝素标签;流感病毒血凝素(HA)肽
【英文名称】HA Peptide; Hemagglutinin Tag;Influenza Hemagglutinin (HA) Peptide
【英文别名】 TYR-PRO-TYR-ASP-VAL-PRO-ASP-TYR-ALA;HA1 fragment 98-106;HA1 FRAGMENT 99-107;INFLUENZA HEMAGGLUTININ (HA) PEPTIDE;HA TAG PEPTIDE;H2N-YPYDVPDYA-OH;YPYDVPDYA;H-TYR-PRO-TYR-ASP-VAL-PRO-ASP-TYR-ALA-OH
【分子式】C53H67N9O17
【分子量】1102.15
【 C A S 】92000-76-5
【单字母】NH2- YPYDVPDYA -COOH
【三字母】NH2- Tyr - Pro - Tyr - Asp - Val - Pro - Asp - Tyr - Ala -COOH
【结构式】
【理化性质】
Number of residues: | 9 | ||
Molecular weight: | 1102.15 g/mol | ||
Extinction coefficient: | 3840 M-1cm-1 | ||
Iso-electric point: | pH 0.54 | ||
Net charge at pH 7: | -2 | ||
Estimated solubility: | Poor water solubility. |
【HA标签的应用】
HA标签可以通过基因重组技术与目标蛋白的N端或C端连接,形成HA标签融合蛋白。由于HA标签具有高亲和力和特异性,可以利用与之特异性结合的抗体或亲和树脂进行高效的蛋白质纯化。此外,HA标签还可以用于蛋白质的检测与定位,通过荧光标记的HA抗体,可以在细胞或组织切片中直接检测带有HA标签的目标蛋白,实现其亚细胞定位的可视化。
【HA标签在蛋白质纯化中的作用】
HA标签,即来源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇的九氨基酸序列(YPYDVPDYA),常被用作蛋白质工程中的融合标签。在蛋白质纯化过程中,HA标签的主要作用是提供一个特定的结合位点,以便使用抗HA标签的抗体进行亲和层析纯化。这种方法可以实现高效的蛋白质捕获和纯化,同时保持蛋白质的活性和结构完整性。
HA标签通常不会与目的蛋白相互作用,并且大多数情况下不会影响目的蛋白的功能,因此它是一个理想的蛋白质标签,用于蛋白质的表达、纯化、鉴定、相互作用和功能研究。
HA标签可以添加到目标蛋白的N端或C端,由于其对蛋白质结构的影响较小,因此适用于多种蛋白质的纯化。在纯化步骤中,含有HA标签的蛋白质可以通过与抗HA抗体结合的亲和树脂被捕获,然后通过改变缓冲条件或使用竞争性解离剂来洗脱出纯化的蛋白质。
此外,HA标签还便于通过ELISA、西方印迹(Western blot)和免疫荧光等免疫学方法对蛋白质进行检测和定量。这些特点使得HA标签成为蛋白质表达和纯化研究中的一个重要工具。
【选择HA标签抗体的考虑因素】
选择合适的HA(血凝素)标签抗体对于实验的成功至关重要。以下是根据实验需求选择抗体时应考虑的关键因素:
1、应用目的:首先明确抗体将用于何种实验,如免疫印迹(Western blot)、免疫荧光染色、免疫沉淀(IP)或流式细胞术等。不同的应用可能需要不同类型的抗体,例如某些检测系统可能要求使用与检测方法兼容的亚型(如鼠单抗或兔多克隆体)。
2、特异性:抗体的特异性决定了其能够准确识别目标蛋白而不与其他分子发生交叉反应。选择高亲和力和高特异性的抗体可以提高实验结果的可靠性。
3、克隆类型:根据实验设计,可能需要特定克隆类型的抗体。例如,如果后续步骤涉及二抗的使用,则需要确保一抗和二抗之间的宿主物种兼容。
4、检测灵敏度:对于低丰度蛋白的检测,应选择高灵敏度的抗体,以便在样品中检测到少量的目标蛋白。
5、批次一致性:为了保证实验重复性,选择同一批号的抗体或已知具有良好批次间一致性的抗体产品是非常重要的。
6、供应商信誉:选择知名供应商的抗体通常能保证产品质量和服务支持。查阅文献和产品数据表,了解抗体在类似实验中的表现也是一个好方法。
7、成本效益:根据研究预算,权衡抗体的价格和性能,选择性价比最高的产品。
【HA标签在细胞生物学中的应用场景】
1、蛋白质表达和纯化:HA标签可以被添加到重组蛋白的N端或C端,这样就可以利用针对HA标签的抗体进行亲和层析,从而实现蛋白质的高效纯化。
2、蛋白质定位和追踪:通过将HA标签融合到目标蛋白上,研究人员可以使用特异性抗体来检测和追踪这些蛋白在活细胞中的定位和动态变化。
3、细胞表面标志物研究:HA标签也可以用于研究细胞表面分子的功能和相互作用,因为它可以帮助研究者识别和操纵细胞表面的特定蛋白。
4、细胞成像:HA标签可以与荧光标记物结合,用于在显微镜下观察和分析细胞内部的蛋白质分布和细胞间的相互作用。
5、生物传感器和生物标记:HA标签的生物素化衍生物可以用于制备生物传感器,或者作为生物标记剂来检测和追踪细胞和分子。
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6xHis Tag;HHHHHH
HA Tag;YPYDVPDYA
Myc Tag;EQKLISEEDL
FLAG Tag;DYKDDDDK
E-tag;GAPVPYPDPLEPR
T7 Tag;MASMTGGQQMG
S-tag;KETAAAKFERQHMDS
Rhodopsin Epitope Tag;TETSQVAPA
3Xflag Tag;MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK
标签:标签,Tag,抗体,纯化,血凝素,HA,蛋白质 From: https://blog.csdn.net/Apeptide008/article/details/142812002